Revista de Osteoporosis y Metabolismo Mineral 00122 / http://dx.doi.org/10.20960/RevOsteoporosMetabMiner.00122

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Trabajo Original

Fallo del estímulo mecánico como efecto intrínseco celular de líneas celulares osteoblásticas con mutaciones Gba1 utilizadas como modelos de la enfermedad de Gaucher ósea

Sara Heredero-Jiménez, Juan David Patiño-Salazar, Eduardo Martín-Guerrero, Núria Martínez-Gil, Mónica Cozar, Diana Ovejero, Xavier Nogués Solán, Laura Cinque, María Arántzazu Rodríguez de Gortázar, Daniel Grinberg, Susana Balcells, Natalia García-Giralt, Raquel Rabionet, Juan Antonio Ardura Rodríguez

Prepublicado: 2026-05-22

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Introducción: La enfermedad de Gaucher (EG) está causada por mutaciones en el gen GBA1 que generan acumulación lisosomal de glucosilceramidas. Los fenotipos óseos relacionados con la EG incluyen deformidad en matraz Erlenmeyer, osteopenia, osteoesclerosis, osteonecrosis y dolor óseo. Si bien la función osteoblástica se ha evaluado previamente en la EG, no existen estudios que evalúen la función osteoblástica bajo estímulo mecánico. Objetivos: Nuestro objetivo fue generar un modelo celular osteoblástico in vitro de la EG y evaluar el efecto del estímulo mecánico en la función de este modelo. Material y métodos: Se suprimió la actividad de GBA1 mediante CRISPR/Cas9 y se seleccionaron dos clones ROS17/2.8 sin actividad enzimática de GBA1. Las células ROS wt y ROS-Gba1KO se sembraron y sometieron a estrés mecánico mediante flujo laminar con una tensión de cizallamiento de 10 dinas/cm², 8 Hz, durante 10 minutos en un dispositivo de tensión de cizallamiento Flexcell® Streamer®. La otra mitad se mantuvo en condiciones estáticas. Finalmente, las células se cultivaron con medio fresco durante 18 h adicionales para realizar la extracción de ARN y la qPCR de biomarcadores osteoblásticos. Durante el proceso, se observó viabilidad y proliferación celular sin cambios significativos entre las diferentes condiciones experimentales. Resultados: como era de esperar, el estímulo mecánico indujo la diferenciación de osteoblastos en todas las líneas celulares analizadas, como se observó en el aumento de los niveles de ARNm de Runx2 y Bglap (osteocalcina). Sin embargo, la expresión de Opg (osteoprotegerina) se redujo significativamente en las células KO en comparación con el grupo control. Conclusión: la falta de actividad de GBA1 reduce la expresión de osteoprotegerina en modelos de osteoblastos estimulados mecánicamente, lo que sugiere una alteración de la comunicación osteoblasto-osteoclasto y, por tanto, una remodelación ósea deteriorada en la EG.

Palabras Clave: Enfermedad de Gaucher. Gen GBA1. Osteoblastos.

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